微生物实验室培养基pH值监控的注意事项

       培养基的配置在我们微生物检测中占有十分重要的地位，影响着实验的成败。通常的培养基配置分为以下步骤：培养基的配制配料—溶解—调PH—过滤—分装—包扎—灭菌—摆斜面—贮存。

        在配制时，首先要确保培养基未结块、颜色未发生变化或其他物理性状明显改变；应按照使用说明上的要求操作，称量应达到相应的精确度；纯化水是配制培养基最常用的溶剂，应确保溶剂的质量符合要求；配制培养基应采用干净且不会对培养基理化特性产生改变的容器。在分装前，应确保培养基完全溶解混匀，加热助溶是最常用的方法，应注意不要过度加热，尤其是含糖量较高的培养基，糖类不耐热的特性会使糖类在高温条件下产生有机酸而使pH值下降。          

       培养基的配置要注意的地方有很多，这次我们着重讲一下培养基pH值监控的重要性、方法以及注意事项：

       首先我们要知道pH值是培养基的常规监控项目，微生物的生长不仅依赖丰富的营养，还需要在适宜的pH值范围内才能正常生长繁殖或体现其生物特性，因此培养基pH值是否符合要求直接影响微生物检验结果。虽然培养基中含有缓冲物质成分，能使培养基的pH尽可能的保持在要求的范围内，但是配出的培养基若不符合要求，就要进行必要的调整。如果有已校准pH计，可用pH计，如果没有，可用精密的pH试纸，再根据需要用1 mol/L氢氧化钠或1mol/L盐酸（微调可用0.1氢氧化钠或0.1mol/L盐酸）调制所需的pH。培基的pH一般为7.4～7.6，也有酸性或碱性的。用氢氧化钠调整的需要高压灭菌的培养基，在调整pH时要调至高出所需0.1个～0.2个单位，因用氢氧化钠调整时，高压灭菌后，培养基的pH要降低0.1~0.2。如培养基中含有碳酸钙成分，可不pH。03pH电极的维护保养目前，实验室使用pH计电极大部分都是复合电极。其优点是使用方便，不受氧化-还原物质的影响，且平衡速度快。使用时应注意以下事项：

       ⒈复合电极不用时，可充分浸泡饱和氯化钾溶液中。切忌用洗涤液或其他吸水性试剂浸洗。

       ⒉使用前，检查玻璃电极前端的球泡。正常情况下，电极应该透明而无裂纹；球泡内要充满溶液，不能有气泡存在。

       ⒊测量浓度较大的溶液时，尽量缩短测量时间，用后仔细清洗，防止被测液粘附在电极上而污染电极。

       ⒋清洗电极后，不要用滤纸擦拭玻璃膜，而应用滤纸吸干, 避免损坏玻璃薄膜、防止交叉污染，影响测量精度。

       ⒌测量中注意电极的银—氯化银内参比电极应浸入到球泡内氯化物缓冲溶液中，避免电计显示部分出现数字乱跳现象。使用时，注意将电极轻轻甩几下。

       ⒍电极不能用于强酸、强碱或其他腐蚀性溶液。

       ⒎严禁在脱水性介质如无水乙醇、重铬酸钾等中使用。

供稿人：韩俊